簡要描述:GelGreen 核酸染料(10,000 × in water)是一種結合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有*設計的熒光染料。在游離狀態(tài)下,GelGreen發(fā)出微弱的熒光,但一旦與雙鏈DNA結合后,熒光大大增強。因此,GelGreen的熒光信號強度與雙鏈DNA的數(shù)量相關。GelGreen與 EB 有相同的光譜特性,無需改變?yōu)V光片及觀察裝置。
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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AN34L033 |
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規(guī)格 | 500μl | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
GelGreen初由美國Biotium公司研發(fā),是一種結合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有*設計的熒光染料,熒光信號強度與雙鏈DNA的數(shù)量相關,與溴化乙錠(EB)有相同的光譜特性,使用觀察EB的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,染色后的DNA條帶在藍光透射下呈現(xiàn)綠色熒光。這種新型染料具有不能穿透細胞膜、與雙鏈DNA的結合力非常強,基因誘變性低,熱穩(wěn)定性高,對分子生物學中常用的酶沒有抑制作用及適用范圍廣等優(yōu)點,得到了市場的廣泛認可。該產(chǎn)品適用于瓊脂糖和聚acrylamide凝膠電泳中的dsDNA、ssDNA及RNA染色。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
GelGreen 核酸染料(10,000 × in water) | AN34L033 | 500 μL | 350 |
運輸與保存
常溫運輸。常溫保存,有效期99個月。
使用方法
膠染法(使用方法同EB,電泳前膠染色)
(1)制膠時按1:10000比例加入GelGreen核酸染料(例如:每50 mL瓊脂糖溶液中加入5 μL GelGreen 10,000×儲液)。由于GelGreen具有良好的熱穩(wěn)定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。此方法不適合預制聚丙烯 xian 胺凝膠。
(2)按照常規(guī)方法進行電泳。
2.泡染法(電泳后膠染色)
(1)按照常規(guī)方法進行電泳后,將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3×染色液(用0.1 M NaCl 溶液稀釋GelGreen染液3300倍形成3×染色液,如將15 μL GelGreen 10,000×儲液加入到50 mL 0.1 M NaCl 溶液,該染色液可重復使用3次,4℃(室溫)避光保存1周)浸沒凝膠。
(2)室溫振蕩染色30 min左右,輕輕搖晃,最佳染色時間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5~10%丙烯 xian 胺的凝膠,染色時間通常介于30 min到1 h,并隨丙烯 xian 胺含量增加而延長。
注意事項
本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。
在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過程中,GelGreen 可以全部從雙鏈核酸上去掉。
如果想對用 GelGreen 染過的膠進行 Southern blots,建議在預雜化和雜化溶液中加入 0.1%~ 0.3% 的SDS。
為了避免染料對核酸遷移的影響,推薦使用泡染法進行染色。
GelGreen對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。
GelGreen原液在室溫保存,如放置冰箱保存會產(chǎn)生部分沉淀,使用前適當加熱并搖勻即可正常使用。
如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度、延長凝膠時間以保證邊緣清晰、改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
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