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下文是細胞增殖及細胞活力檢測方法介紹,快來看看吧!
新品簡介
李記生物EdU檢測試劑盒,可以高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。
不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。
產(chǎn)品優(yōu)勢
準(zhǔn)確:與BrdU方法相比,EdU檢測不需要DNA變性,不需要抗原修復(fù),不需要抗原抗體反應(yīng)。
靈敏:EdU細胞增殖檢測可以直接并準(zhǔn)確地檢測出新DNA的合成。
便捷:能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,以檢測細胞其他性狀特征。
案例圖示
檢測方法
1.DNA合成檢測——BrdU / EdU檢測法
細胞在增殖過程中,DNA的倍增,是顯著的變化之一,通過檢測DNA量的變化,可判斷細胞數(shù)量的變化。
EdU檢測法是BrdU的替代方法,也是目前更廣泛適用的方法,RrdU需抗體在破開DNA雙聯(lián)后與抗原分子集合后才能顯示,這個處理過程對細胞有損傷,而EdU同樣可以代替胸腺嘧啶(T)滲入DNA,但其分子大小只有BrdU的1/500,可以直接在DNA雙鏈形態(tài)下與染料分子結(jié)合用于檢測,無需抗體結(jié)合反應(yīng),實驗過程簡單,對細胞損傷小,是新一代基于DNA檢測時報增殖的試劑。
2.代謝活性物質(zhì)檢測——MTT、CCK8
CCK8中的主要物質(zhì)WST-8是一種類似于MTT(對細胞有損傷)的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶還原生成橙黃色的、水溶性formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;反之,則顏色越淺。CCK-8對細胞基本無毒性,可進行活細胞動態(tài)測定,試劑穩(wěn)定即開即用,重復(fù)性好于MTT。
3.羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂(CFSE)檢測法
羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂(CFSE)是一種可穿透細胞膜的熒光染料, CFSE進入細胞后可以不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結(jié)合偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上。當(dāng)細胞分裂時,CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,子代細胞熒光強度是親代細胞的一半,在一個增殖的細胞群中,各連續(xù)代細胞的熒光強度遞減,利用流式細胞儀在488nm激發(fā)光和熒光檢測通道可對其進行分析。
4.ATP濃度檢測
細胞內(nèi)的ATP是細胞能量的重要來源,其含量與細胞周期和細胞狀態(tài)關(guān)系密切,死細胞或瀕臨死亡的細胞幾乎不含ATP。利用熒光素酶Luciferase及其底物熒光素Luciferin的ATP檢測以生物發(fā)光為基礎(chǔ),能夠為您提供非常靈敏的結(jié)果,這種方法非常適用于高通量細胞增殖檢測和篩選。
5.細胞增殖相關(guān)抗原檢測
Ki-67,PCNA都是細胞增殖因子,在細胞異常增殖中均有顯著的表達差異,是研究腫瘤細胞增殖的重要核抗原。Ki-67,PCNA均與細胞周期密切相關(guān),通過免疫反應(yīng)檢測Ki-67,PCNA可反應(yīng)腫瘤細胞增殖情況。
細胞增殖/活性檢測方法比較,常見細胞增殖/活性檢測方法比較見下表(含李記生物產(chǎn)品、貨號)
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注意事項:
活動時間:2022.8.22-2022.9.16
活動范圍:全國生物相關(guān)終端客戶
活動編號:Li220822I
所有活動均需關(guān)注李記微信公眾號
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