說說溶酶體染色試劑盒的特點(diǎn)概述
更新時(shí)間:2018-05-22 點(diǎn)擊次數(shù):1240
溶酶體染色試劑盒是設(shè)計(jì)用來標(biāo)記活細(xì)胞的線粒體的,使之帶上不同顏色的熒光。本試劑盒使用一種專屬染料,選擇性地在溶酶體中積累。這種LysoBrite溶酶體指示劑是一種疏水性復(fù)合物,可以輕易地滲透進(jìn)入活細(xì)胞中,且當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性溶酶體指示劑可以在線粒體中保留很長(zhǎng)時(shí)間,因?yàn)樵撝甘緞в心芏ㄎ挥诩?xì)胞的基團(tuán)。其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著性提高。 Cell Navigator溶酶體染色試劑盒標(biāo)記方法十分穩(wěn)定,需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中,例如微孔板分析,免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)。它也可以用于多種不同類型的研究中,包括細(xì)胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性的研究。
溶酶體染色試劑盒細(xì)胞化學(xué)染色法,SA-βgal在pH6.0時(shí),可將 5-溴-4-氯-3-吲哚基 β-D-吡喃半乳糖苷(5-bromo-4-chloro-3-indoyl β-D-galactopyranoside ,X-gal)水解,產(chǎn)生不溶于水的藍(lán)色物質(zhì)。這種藍(lán)色產(chǎn)物相當(dāng)穩(wěn)定,固定干燥后避光可保存幾個(gè)月。通過計(jì)算總?cè)后w中藍(lán)色細(xì)胞的數(shù)量,可以很容易地確定SA-β-半乳糖苷酶陽(yáng)性的細(xì)胞比例,即衰老細(xì)胞的比例。但是需要注意的是,在所有細(xì)胞中普遍存在酸性半乳糖苷酶(acidic β-galactosidase),在pH4.0時(shí)發(fā)揮作用。其實(shí)SA-βgal發(fā)揮作用的zui適pH為4.5,但是在pH4.5時(shí),酸性半乳糖苷酶也會(huì)水解底物,因此需要使用SA-βgal次適pH6.0,才能確保藍(lán)色產(chǎn)物是由于SA-βgal的作用而產(chǎn)生的。通常我們使用pH為6.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。
溶酶體染色試劑盒目前針對(duì)溶酶體的定位也主要圍繞酸性磷酸酶展開。經(jīng)典的溶酶體熒光染色試劑盒(藍(lán)/綠/橙/紅色)— 超越LysoTracker!LysoTracker系列溶酶體熒光染料被廣泛應(yīng)用。然后由于其細(xì)胞毒性,LysoTracker在染色幾個(gè)小時(shí)后便失去檢測(cè)效應(yīng),更不能隨細(xì)胞傳代而持續(xù)示蹤染色。另外,LysoTracker的較容易淬滅的光學(xué)不穩(wěn)定性也經(jīng)常被一些研究者所詬病。 在此,艾美捷特向您推薦由LysoBrite新一代溶酶體專屬熒光染料組成的系列溶酶體熒光染色試劑盒產(chǎn)品。作為新一代熒光染色,LysoBrite具有更低細(xì)胞毒性、更亮的熒光強(qiáng)度,和更高的熒光耐淬滅性。