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SmartCell溶酶體染色試劑盒*Red*使用說明書

發(fā)布時間:2017/11/15      點擊次數(shù):1130

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SmartCell溶酶體染色試劑盒*Red*

產(chǎn)品名稱

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價格(元)

SmartCell溶酶體染色試劑盒*Red*

C6244L0560

500 assays

-20℃

2450

 

產(chǎn)品描述

溶酶體是細胞內(nèi)具有單層膜囊狀結(jié)構(gòu)的細胞器,溶酶體被比喻為細胞內(nèi)的“酶倉庫”“消化系統(tǒng)”,溶酶體內(nèi)含有許多種水解酶類能夠?qū)⒓毎淌蛇M的食物或致病菌等大顆粒物質(zhì)消化成生物大分子,殘渣通過外排作用排出細胞,分解很多種物質(zhì),也能在細胞分化過程中,將陷入溶酶體內(nèi)某些衰老細胞器和生物大分子消化。溶酶體膜內(nèi)pH值約4.5-4.8,使得消化酶類可以在酸性條件下工作,溶酶體外的胞質(zhì)內(nèi),pH值為7.2左右,溶酶體膜通過從胞質(zhì)泵入H+維持溶酶體內(nèi)外這種pH差異。

Smart Cell溶酶體染色試劑盒*Red*可以標記活細胞中的溶酶體,使之帶紅色熒光(Ex/Em =575/597nm)。本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物,屬趨溶酶體染料,染料滲透進入完整的活細胞中,有選擇性進入溶酶體,并因溶酶體膜內(nèi)外的不同pH環(huán)境而被鎖定在溶酶體中。染料一旦進入溶酶體,熒光顯著性增強非常穩(wěn)定。基于這一特點,本試劑盒可以用于酶標版、免疫組化和流式細胞術(shù)等應(yīng)用,用于多種不同類型的研究中,包括細胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細胞活性、細胞凋亡和細胞毒性的研究適用于增殖型和非增殖型細胞,也可以用于懸浮和貼壁細胞。

Smart Cell溶酶體染色試劑盒Life-iLab公司專門研發(fā)的一類熒光成像工具,試劑盒設(shè)計嚴謹,人為手動操作的步驟很少。用來標記細胞器、亞細胞等結(jié)構(gòu),例如細胞膜、溶酶體、溶酶體和細胞核等。Smart Cell溶酶體染色試劑盒提供了標記溶酶體的全套試劑,針對每種細胞結(jié)構(gòu)都能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光供選擇,既可單獨使用,也支持對細胞的多重熒光分析。這種的細胞標簽為從空間上和時間上研究發(fā)生的細胞活動提供了一種十分有效的方法。

試劑盒組分

組分

數(shù)量

Component A: LysoBrite Red染料 

100 µL (500 X DMSO stock solution)

Component B: 活細胞染色緩沖液 

50 mL

使用方法 

 1. 準備溶酶體染色液

1.1 室溫避光放置5-10分鐘,預(yù)熱LysoBrite Red染料(Component A)。 

1.2 20µL預(yù)熱好的LysoBrite Red染料(Component A),10 mL活細胞染色緩沖液(Component B)進行稀釋。 

注意:1) 20μL LysoBrite Red染料(Component A)足夠完成1塊96孔板實驗,剩余的LysoBritRed染料(Component A) 可以根據(jù)需要分裝避光保存于-20℃,避免反復凍融。2)*染料濃度根據(jù)具體應(yīng)用會有不同,染色條件根據(jù)細胞類型、細胞或組織的染料滲透性不同可以進行調(diào)整優(yōu)化。

2. 細胞染色 

2.1 貼壁細胞:在96孔板(100μL)或培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)細胞,當細胞達到70-80%融合度,在96孔板或培養(yǎng)皿內(nèi)添加等體積的染色工作液(步驟1.2),在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用 TRITC濾光片在顯微鏡下進行熒光觀察

 

注意:如果細胞沒有充分染色,可以適當增加染料濃度或增加染色時間進行改善

2.2 懸浮細胞1000 rpm 條件下離心細胞培養(yǎng)液5分鐘,棄去上清,用預(yù)熱好的細胞培養(yǎng)液溫和的重懸細胞,然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2),在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用 TRITC濾光片在顯微鏡下進行熒光觀察。

 

                           圖1:U2OS 細胞用SmartCell溶酶體染色試劑盒*Red*染色后進行成像分析

                             (所用96孔板為Costar black)

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產(chǎn)品信息貨號規(guī)格保存價格(元)
SmartCell溶酶體染色試劑盒*Green 405*C6244L0556500 assays-20℃2450
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