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李記生物預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(蛋白Marker的分類與選擇)

更新時間:2024-08-23      點擊次數(shù):206

蛋白Marker即蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn),是幾種已知分子量的蛋白質(zhì)的混合物,像“尺子"一樣用來指示蛋白質(zhì)條帶的大小。在Western Blot實驗中,蛋白Marker主要是用來指示蛋白條帶所對應(yīng)的分子量大小,此外,蛋白Marker還可以用來輔助判斷蛋白轉(zhuǎn)膜是否成功或蛋白在凝膠上的電泳進度等作用,所以選擇合適的蛋白Marker也是實驗成功的重要條件之一。 

李記生物預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)

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預(yù)染蛋白在不同的緩沖體系下有不同的表觀分子量,以上2個圖片為兩種緩沖體系下的電泳示意圖。適合作為 SDS-PAGE 和 Western Blot 的蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)??捎糜赟DS-PAGE和Western Blot實驗中蛋白分子量大小的參照。

蛋白Marker的分類

 • 未預(yù)染 Marker:非預(yù)染蛋白Marker在電泳過程中看不到,電泳結(jié)束后經(jīng)過蛋白染色后才能起指示作用,無法在實驗過程中起預(yù)示作用。但是由于蛋白沒有附帶染料分子或者是標(biāo)記分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,所以最準(zhǔn)確。

 • 預(yù)染 Marker:含染料和蛋白,肉眼看見,可直接觀察電泳進程和轉(zhuǎn)膜是否完quan,較為常用。但 Marker 蛋白跟染料共價偶聯(lián)導(dǎo)致蛋白分子電泳的遷移效率發(fā)生改變,其指示的分子量不是精確值而有一定誤差。

 • 曝光 Marker:在曝光步驟中,可將目的條帶和 Marker 條帶同時曝光顯示,減小誤差,并克服了預(yù)染 Marker 遷移率的改變,但價格昂貴。

蛋白Marker的選擇

 • 范圍覆蓋

   選擇蛋白 Marker 時,確保其分子量范圍能夠覆蓋所要研究的目標(biāo)蛋白的大小。一般來說,選擇分子量較小、中等和較大的標(biāo)準(zhǔn),以涵蓋不同大小的蛋白。

 • 雙標(biāo)記 Marker

   有些 Marker 是雙標(biāo)記的,可以在電泳過程中染色,這樣的 Marker 適用于雙色標(biāo)記(例如熒光和化學(xué)發(fā)光)的應(yīng)用,提供更多的實驗選擇。

 • 質(zhì)量和穩(wěn)定性

   選擇來自可靠供應(yīng)商的高質(zhì)量和穩(wěn)定的蛋白 Marker,確保其性能的一致性和準(zhǔn)確性。

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